20个遗传性耳聋家庭的产前诊断

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中华耳科学杂志,年18卷5期

20个遗传性耳聋家庭的产前诊断王淑娟梁鹏飞李琼

王剑邱建华查定军

耳聋是严重影响人们生活质量的残疾之一。据年统计，我国的听力障碍患者人数已经高达万，在各类残疾中高居第二位[1]。每名新生儿中，就有1~3例出现听力异常[2,3]，推测目前我国的耳聋人群数目会更加庞大，防聋形势非常严峻。耳聋发病原因分为遗传性因素和环境因素[4]。其中由基因缺陷造成的耳聋大约占60%[5]。流行病学调查显示，GJB2、SLC26A4和线粒体12SrRNA是我国最常见的耳聋基因[6-8]，约44.76%的先天性聋因这三种基因变异所致[8]。在本研究中，通过耳聋基因筛查，明确聋人家庭中先证者病因，且患者父母双方均是致病基因的携带者，指导患者母亲在孕期进行产前诊断。产前诊断在耳聋患者家庭的再生育中对防止聋儿的出生有着重要的意义。

1资料和方法

1.1研究对象

20例经基因检测明确为遗传性感音神经性聋患者，均就诊于医院耳聋咽喉头颈外科。通过行为测听、声导抗、耳声发射、听性脑干反应以及颞骨CT、MRI扫描及全身体格检查，排除了综合征型聋。20个遗传性聋家庭均有强烈的再生育要求。本项目对家庭成员进行详细的问询，包括基本信息、先证者耳聋相关病史、既往史、家族史以及先证者母亲孕期身体状况、用药史、外伤史等。

1.2方法1.2.1基因检测

采集先证者及其父母的外周血3ml，EDTA抗凝，百泰克中量全血DNA提取试剂盒提取血液基因组DNA，Nanodrop微量分光光度计测定DNA的纯度和浓度，取适量样本稀释至浓度为~ng/μl后，其余-20℃保存。对常见耳聋基因的GJB2编码区、SLC26A4编码区外显子及剪切位置附近[9]、线粒体12SrRNA的m.和m.位点进行Sanger测序分析。

比对先证者与其父母的基因型后，向患者家庭提供详细的耳聋遗传知识，并给予科学的遗传咨询。孕妇进行产前诊断前，签订产前诊断知情同意书，根据孕期时间决定超声引导下绒毛膜或羊水取材[5,10]。若孕期10~13周，行绒毛膜活检术抽取胎盘绒毛10mg；若孕期16周以上，抽取羊水20ml。用QIAampDNAMiniKit试剂盒提取绒毛膜或羊水DNA；针对该家庭相应的耳聋致病变异进行Sanger测序，明确胎儿基因型。

1.2.2STR基因型检测

为了保证样品的准确性并排除母体污染[11]，选取3个STR位点(D21S，D21S，D21S)在ABI测序仪上分别对相关家系中母亲、父亲及胎儿的DNA进行检测。利用GeneMapper软件自动分析等位基因的基因型。

2结果

2.个聋儿家庭基本情况

20个家庭中先证者的父母听力均为正常，其中F1~F10家庭中先证者的CT、MRI未显示异常；F11~F20先证者的CT、MRI结果显示双侧前庭导水管扩大（Enlargementofthevestibularaqueduct，EVA）。CT诊断的标准是利用Valvassori规定[12]，半规管总脚到前庭水管外口1/2处直径(MidpointMeasurement，MP）≥1.5mm或前庭水管外口直径（OperculumMeasurement，OP）≥2mm即为大前庭导水管综合征。这20个家庭的基本情况及临床表现，详见表1。

2.个家庭中父母耳聋基因型检测结果

采用Chromas软件对Sanger测序结果进行分析，使用DNAMAN软件进行序列比对分析。以GenBank中GJB2基因序列（ID:)及SLC26A4基因序列（ID:）为标准比对序列，检测结果见表2。查询疾病数据库

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